血液RNA提取的挑戰與難點
血液是生命科學研究中最常用的生物樣本之一。然而,由于其成分復雜且含有大量RNase,血液RNA的提取成為科研中的一大難題。
賽百純生物的解決方案
為了解決這一挑戰,廣州賽百純生物科技有限公司推出了核酸提取或純化試劑盒(血液RNA提取試劑)磁珠法,本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的全血(用檸檬酸鹽,EDTA或肝素等抗凝劑處理過的血液樣品)樣本中提取總RNA ,采用特異性結合RNA的納米磁珠和獨特的緩沖液體系。硅羥基納米磁珠能高效、專一吸附RNA,可最大限度去除雜質蛋白等,提取的RNA純度高,質量穩定,沒有蛋白質和其他雜質污染,可直接用于下游實驗。
核酸提取或純化試劑盒(血液RNA提取試劑)磁珠法
特點和優勢
· 不使用任何有毒試劑,安全高效,對酚、氯仿等有毒試劑說拜拜;
· 操作簡單,省力氣;無需單獨裂解紅細胞,不用離心,直接加樣;
· 單人份提取,靈活可取;
· RNA 純度高,DNA殘留低;
· 與傳統裂解紅細胞的方案,同樣操作24個樣的情況下,能節省約4個小時;
· 耗材廠家注塑,成本價格可控,同樣的價格,不一樣的享受。
實驗結果
某三甲醫院全血樣本1-8,使用271602血液RNA提取試劑盒對樣本進行提取,得到的核酸測量濃度、純度,在跨外顯子區域(exon spanning primer&probe)設計引物,對得到的RNA進行反轉錄和非反轉錄擴增,計算 △Ct值。

使用某隆Gentier 96E熒光定量PCR擴增,擴增曲線、熔解曲線圖如下:

圖1 逆轉錄組樣本擴增曲線圖

圖2 無逆轉錄組樣本熔解曲線圖


由結果可知:△CT(不轉錄組CT-轉錄組CT)均大于5,說明提取后RNA中殘留的基因組DNA較少,所得到的RNA成分純度高,適用于后續RNA診斷。
配套儀器
MDx-12全自動DNA甲基化一體機
儀器特點:
· 獨特的混合方式
采用水平偏心運動加磁套垂直攪拌的組合方式,實現大體積樣本處理;
· 甲基化一步到位
采用獨有的雙排11孔試劑條,實現核酸純化到DNA甲基化一步到位,同時節省空間;
· 樣本處理體積大
最高可處理10ml樣本,洗脫體積最小可至20ul,輕松實現核酸高度濃縮;
· 可自由編程
具有程序分組,便于程序管理;程序自定義編輯功能,操作靈活,可滿足不同試劑的要求;
· 系統后臺強大
用戶可自定義系統后臺,并可保存多組后臺參數,方便匹配不同的實驗方案;
· 污染控制
1)內置紫外消毒模塊,可定時進行紫外消毒;
2)獨特的定向排風結構設計,有效避免氣溶膠的污染。
· 工作效率高
2小時即可實現12個樣本的核酸提取純化以及甲基化處理;
· 試劑開放
兼容各種磁珠法核酸提取試劑及DNA甲基化試劑;
· 人性化設置
甲基化DNA自動轉移至1.5ml離心管,無需用戶自己轉移;
· 安全可靠
開門后自動停止紫外消毒、提取運行,保障操作安全。
封閉性實驗艙最大程度減少操作者與試劑的接觸。智能化操作,避免有害物質對人體的危害;
· 通量靈活
用戶根據自己的需求可自由選擇1-12樣本通量,不浪費耗材。